实验室需要购买TRIpure Reagent (总RNA提取试剂）,博凌科为的怎么样?有人用过没有

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/04 11:50:16

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我们实验室目前使用的就是博凌科为的TRIpure 试剂,它是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂.它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性.加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层.RNA存在于水样层中.收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原.在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原.乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白.共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用.
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果.TRIpure 试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品.所有的操作可以在一小时内完成.TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染.故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆.如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA.并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA,5S).当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8.
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