作业帮伊红美蓝的作用原理.最好有个图什么的...
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/06 04:49:37
伊红美蓝的作用原理.最好有个图什么的...
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瑞氏（Wright's staim；美蓝－伊红Y）染色：
1．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Y）染料.
2．用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液.甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用：
（1）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色.
甲 醇
ME（瑞氏染料）----→M+ + E-
在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应.
（2）甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应.
3.瑞氏染液配制：
(1) 瑞氏染液配制：
瑞氏染料 830gm或1g
甲醇（AR） 500ml或600ml
○先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着.
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶）,再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口.
○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳.
(2) 缓冲液：
●缓冲液作用：
○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解.
○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定,PBS的pH 一般在***~6.8,
○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH恒定.
●缓冲液配制（pH6.6.8,弱酸性）：
配方1 ：配方2：
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O(新鲜) 加至1000ml
置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废.