计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/22 03:11:18
![计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的](/uploads/image/z/767369-65-9.jpg?t=%E8%AE%A1%E7%AE%97%E6%84%9F%E5%8F%97%E6%80%81%E7%BB%86%E8%83%9E%E8%BD%AC%E5%8C%96%E7%8E%87%E5%85%AC%E5%BC%8F%E4%B8%AD%E7%9A%84%E7%A8%80%E9%87%8A%E5%80%8D%E6%95%B0%E6%8C%87%E7%9A%84%E6%98%AF%E5%93%AA%E4%B8%AA%E7%9A%84%E7%A8%80%E9%87%8A%E5%80%8D%E6%95%B0%3F%E6%98%AF%E6%8C%87%E6%8C%91%E8%8F%8C%E6%8E%A5%E7%A7%8D1%EF%BC%9A100%E7%9A%84%E9%82%A3%E4%B8%AA%E6%AF%94%E4%BE%8B%E5%90%97%3F%E8%BD%AC%E5%8C%96%E5%AD%90%E6%80%BB%E6%95%B0%EF%BC%9D%E8%8F%8C%E8%90%BD%E6%95%B0%C3%97%E7%A8%80%E9%87%8A%E5%80%8D%E6%95%B0%C3%97%E8%BD%AC%E5%8C%96%E5%8F%8D%E5%BA%94%E5%8E%9F%E6%B6%B2%E6%80%BB%E4%BD%93%E7%A7%AF%EF%BC%8F%E6%B6%82%E6%9D%BF%E8%8F%8C%E6%B6%B2%E4%BD%93%E7%A7%AF+%E6%88%91%E7%94%A8%E7%9A%84%E6%98%AFCaCl2%E6%B3%95%E5%88%B6%E5%A4%87%E7%9A%84)
计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的
计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?
是指挑菌接种1:100的那个比例吗?
转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
我用的是CaCl2法制备的
计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的
转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子,根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:
转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
转化频率(转化子数/每ug 质粒DNA)=转化子总数/质粒DNA 加入量(ug)
下面以大肠杆菌TG1电转感受态为例给你演示一下:
第一天,上午取大肠杆菌TG1菌液划线平板(一般要48小时以上才能长出单克隆 )
第三天,在长有单克隆的平板上挑一个生长状态好的单克隆接到4ML新鲜培养基,过夜培养
第四天,如你说的,按1:100扩大培养;OD达到0.5-0.6开始制备感受态细胞
制备好的感受态细胞分装到1.5EP管中,一般为100UL每管
感受态效价的测定:
转0.1ng标准质粒到100ul的感受态细胞中----1.5KV电压电击----37度培养1小时----稀释 涂布
所谓的“稀释倍数”是指这的稀释
一般情况下TG1电转感受态的效价(即转化频率)在10^8--10^9
所以反推预测,我们一般会稀释10^-2---10^-3梯度来涂布.
如果涂布50ul,假设在10^-2板上N个菌落,
套公式:
转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
转化子总数=N×10^2×100/50=2N×10^2
转化频率(转化子数/每ug 质粒DNA)=转化子总数/质粒DNA 加入量(ug)
转化频率=2N×10^2/10^-4(0.1ng=10^-4ug)
=2N×10^6
你自己推算一遍,如果在10^-3板上Y个菌落的转化频率是否为2Y×10^7.
一样的,只不过是不同方法制备的感受态细胞,一个是电转感受态,你的是化转感受态.计算方法还是相同地.