为什么我在测细菌的OD值时,没有最大吸收峰出现呢?我想做一个全扫描,我的培养基是无色的,样品是3ml菌液,参比用的3ml培养液,但感觉那样太浪费营养液了,于是对菌体进行了离心洗涤,然后用水
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/22 00:38:59
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为什么我在测细菌的OD值时,没有最大吸收峰出现呢?我想做一个全扫描,我的培养基是无色的,样品是3ml菌液,参比用的3ml培养液,但感觉那样太浪费营养液了,于是对菌体进行了离心洗涤,然后用水
为什么我在测细菌的OD值时,没有最大吸收峰出现呢?我想做一个全扫描,
我的培养基是无色的,样品是3ml菌液,参比用的3ml培养液,但感觉那样太浪费营养液了,于是对菌体进行了离心洗涤,然后用水进行稀释,稀释10倍,选择水做参比,这样测也没有最大吸收峰,并且做出来的曲线跟基线没什么差别,是不是在洗涤的过程中把菌体也给洗掉了?现在很纠结,到底直接测OD600呢?还是自己找最适合的波长?因为刚开始生物实验,好多不懂,希望高人点拨,
为什么我在测细菌的OD值时,没有最大吸收峰出现呢?我想做一个全扫描,我的培养基是无色的,样品是3ml菌液,参比用的3ml培养液,但感觉那样太浪费营养液了,于是对菌体进行了离心洗涤,然后用水
直接测OD600!做了多年微生物酶听说过离心稀释测生长曲线的.最好是一次性做20支试管的液体培养基同时开始培养,每2小时取出一管测定OD600,这样不影响其他试管继续培养,12小时之间可以每4小时测定一次(这段时间是快速生长期测太频繁没什么意义),12~26最好每2小时测定一次(一般快速生长转入稳定期就在这个期间一定要检测,就是你所谓的最大吸收峰),26小时后可以每4小时测定一次(这时已经进入稳定期没什么好测得了),一般微生物生长曲线48小时就够了~有什么不明白的再问我吧
你可以算下离心力 看是否是这个问题
可能是细菌数目太少,建议延长培养时间再测!
实验室确定细菌生长密度和生长期,一般根据经验或麦氏比浊管推断细菌的浓度,但是麦氏比浊管遇到藤黄菌,或者短小、芽胞,就不容易判断。在遇到要求较高的实验,采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液,之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作,必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数,做出校正曲线。通常我们实验室采用的都是...
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实验室确定细菌生长密度和生长期,一般根据经验或麦氏比浊管推断细菌的浓度,但是麦氏比浊管遇到藤黄菌,或者短小、芽胞,就不容易判断。在遇到要求较高的实验,采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液,之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作,必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数,做出校正曲线。通常我们实验室采用的都是OD600,如果你的实验要求特别高,可以先用紫外跑一个最大吸收峰,确定最大吸收波长,然后再用此波长进行浓度测定,我想文献中不同的OD值也是这样来的。
收起
我也向请教个问题,测完od值后早呢么算平均数呢?有什么要求吗?