大鼠的肺组织做western前怎么处理,我的其中要检测的蛋白有磷酸化的,需要加磷酸酶抑制剂吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 22:52:33
大鼠的肺组织做western前怎么处理,我的其中要检测的蛋白有磷酸化的,需要加磷酸酶抑制剂吗?

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大鼠的肺组织做western前怎么处理,我的其中要检测的蛋白有磷酸化的,需要加磷酸酶抑制剂吗?
液氮冷冻 然后研磨成粉末 然后按细胞提取蛋白步骤处理即可 就是加裂解液 然后95°煮10分钟 再加Loading buffer
需要加磷酸化酶抑制剂

一抗一般稀释1000倍,二抗一般稀释2000-4000倍。 你自己可以试试,按照上面说的做,结果太亮就再多稀释些,太暗就少稀释些。

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